灵芝浸出物检测 鉴别检验 中国药典检测

以下是针对 灵芝浸出物 的 鉴别检验 及 中国药典（ChP）检测方法 的详细指南，涵盖定性鉴别、定量分析及关键质量控制指标：

一、检测依据

1. 现行标准：

• 《中华人民共和国药典》2020年版（ChP 2020）一部（灵芝标准：页码267）。

• 灵芝浸出物 相关检测方法参考 附录2201（浸出物测定法） 及 附录0402（薄层色谱法）。

二、鉴别检验（定性分析）

1. 薄层色谱（TLC）鉴别

• 标准依据：ChP 2020 灵芝项下【鉴别】（2）

• 步骤：

1. 供试品溶液：取灵芝浸出物粉末1g，加甲醇30mL，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解。

2. 对照品：灵芝酸A（Ganoderic acid A）或灵芝对照药材。

3. 薄层板：硅胶G板，展开剂：石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-甲酸（15:5:1，上层）。

4. 显色：10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，日光及365nm紫外灯下观察。

• 判定：供试品色谱中，在与对照品相应位置显相同颜色斑点（如灵芝酸A显紫红色）。

2. 显微鉴别

• 适用对象：灵芝原药材粉末（非浸出物）。

• 特征：菌丝无色或棕色，有分枝；孢子卵圆形，直径8-11μm，壁双层（ChP 2020灵芝项下【鉴别】（1））。

三、浸出物含量测定（定量分析）

1. 水溶性浸出物

• 标准依据：ChP 2020 附录2201（热浸法）。

• 步骤：

1. 取浸出物粉末2g（过二号筛），精密称定，置锥形瓶中。

2. 加水50mL，密塞，称重，静置1小时后加热回流1小时。

3. 冷却后补足减失重量，滤过，取滤液25mL蒸干，105℃干燥3小时，称重。

• 计算：

  水浸出物含量=残渣重量样品重量×2550×水浸出物含量=样品重量×5025残渣重量×

• 标准要求：≥3.0%（具体以企业内控标准为准）。

2. 醇溶性浸出物

• 方法：同水浸出物，改用 70%乙醇 作为溶剂。

• 意义：评估三萜类等脂溶性成分含量。

四、有效成分定量检测（HPLC法）

1. 三萜类含量测定（灵芝酸）

• 标准依据：ChP 2020 灵芝项下【含量测定】。

• 色谱条件：

• 色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，5μm）。

• 流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（85:15）。

• 检测波长：252nm。

• 对照品：灵芝酸A（或总三萜以齐墩果酸计）。

• 计算：外标法计算灵芝酸含量，要求 总三萜≥0.5%（以干燥品计）。

2. 多糖含量测定

• 标准依据：ChP 2020 附录0832（苯酚-硫酸法）。

• 步骤：

1. 浸出物水提液加乙醇沉淀多糖，离心后溶解。

2. 与苯酚、浓硫酸反应，490nm测吸光度，以葡萄糖标准曲线计算。

• 标准要求：≥0.9%（具体视产品规格而定）。

五、检测报告模板