畜禽产品中土霉素、四环素、金霉素残留检测方案
适用于肉类（猪肉、鸡肉、牛肉）、蛋类、奶制品等畜禽产品的兽药残留检测，确保符合中国《GB 31650-2019 食品安全国家标准食品中兽药Zui大残留限量》及欧盟《EC No 37/2010》等法规要求。
1. 检测标准与方法
| 兽药名称 | Zui大残留限量（MRL） | 检测方法标准 |
|---|---|---|
| 土霉素 | 肌肉：100 μg/kg；肝脏：300 μg/kg | GB/T 21317-2007（HPLC法） |
| 四环素 | 肌肉：100 μg/kg；牛奶：100 μg/kg | NY/T 829-2004（LC-MS/MS法） |
| 金霉素 | 肌肉：100 μg/kg；鸡蛋：200 μg/kg | SN/T 2538-2010（液相色谱法） |
2. 检测技术流程
（1）样品前处理
均质化：取畜禽产品（肌肉、肝脏、蛋、奶）均质粉碎。
提取：
加入 0.1 mol/L Na₂EDTA-McIlvaine缓冲液（pH=4.0），振荡提取10 min。
离心（8000 rpm，10 min），取上清液。
净化：
通过 HLB固相萃取柱（或C18柱），去除脂肪和蛋白质干扰。
洗脱液：甲醇-水（8:2, v/v），氮吹浓缩至干，用流动相复溶。
（2）仪器分析
① 高效液相色谱（HPLC-UV）
色谱条件（参考GB/T 21317-2007）：
色谱柱：C18柱（250 mm × 4.6 mm, 5 μm）
流动相：0.01 mol/L 草酸-乙腈（75:25, v/v）
检测波长：350 nm（四环素类特征吸收峰）
流速：1.0 mL/min，柱温：30℃
② 液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）（更高灵敏度）
质谱条件（参考NY/T 829-2004）：
土霉素：m/z 461 → 426
四环素：m/z 445 → 410
金霉素：m/z 479 → 444
离子源：电喷雾电离（ESI+）
监测离子对（MRM）：
3. 关键注意事项
避免假阳性：
四环素类易与金属离子（Ca²⁺、Mg²⁺）结合，需用EDTA缓冲液解离。
灵敏度控制：
HPLC-UV检出限：10 μg/kg；LC-MS/MS可达0.1 μg/kg。
回收率验证：
加标回收率应满足 70%~120%（GB/T 27404-2008）。
4. 结果判定与法规限值
| 样品类型 | 土霉素（μg/kg） | 四环素（μg/kg） | 金霉素（μg/kg） |
|---|---|---|---|
| 肌肉组织 | ≤100 | ≤100 | ≤100 |
| 肝脏 | ≤300 | ≤300 | ≤600 |
| 鸡蛋 | - | - | ≤200 |
| 牛奶 | ≤100 | ≤100 | ≤100 |
注：欧盟对四环素类总和限值（肌肉：100 μg/kg；肝脏：300 μg/kg）。
5. 推荐检测机构
中国：中国检验检疫科学研究院（CAIQ）、华测检测（CTI）。
国际：、Eurofins（具备欧盟EU 37/2010认证）。
前处理关键：EDTA缓冲液提取 + HLB柱净化。
仪器选择：
常规筛查：HPLC-UV（成本低）。
精准定量：LC-MS/MS（高灵敏度）。
合规依据：中国GB 31650-2019、欧盟EC 37/2010。
