大米总抗氧化能力检测 总酚含量检测

大米作为全球主要粮食作物，其抗氧化成分（如总酚类物质）的含量直接影响其营养价值和保健功能。以下是关于大米总抗氧化能力检测与总酚含量检测的详细指南，涵盖检测原理、方法、步骤及注意事项：

总抗氧化能力检测

1. 检测原理

总抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity, TAC）反映样品中所有抗氧化物质（如酚类、黄酮类、维生素C/E等）的综合抗氧化效果。常用方法通过清除自由基（如DPPH、ABTS）或抑制氧化反应（如FRAP法）来量化抗氧化能力。

2. 常用检测方法

3. 检测步骤（以DPPH法为例）

1. 样品制备：

• 取5g大米样品，粉碎后过60目筛。

• 用70%乙醇按1:10（w/v）比例提取，超声辅助30分钟，离心取上清液，定容至50mL。

2. DPPH溶液配制：

• 称取0.02g DPPH，用无水乙醇溶解并定容至250mL，配制成0.2mmol/L溶液（避光保存）。

3. 反应与测定：

• 取2mL样品提取液与2mL DPPH溶液混合，避光反应30分钟。

• 以无水乙醇为空白，测定517nm波长下的吸光度（A样品）。

• 对照组：2mL无水乙醇+2mL DPPH溶液，测吸光度（A对照）。

4. 计算抗氧化能力：

• 抗氧化率（%）= [(A对照 - A样品) / A对照] × 100

• 以Trolox（水溶性维生素E类似物）为标准品绘制标准曲线，计算总抗氧化能力（μmol Trolox e/g DW）。

总酚含量检测

1. 检测原理

总酚含量（Total Phenolic Content, TPC）通过酚类物质与福林-肖卡试剂（Folin-Ciocalteu reagent）在碱性条件下发生氧化还原反应，生成蓝色络合物，吸光度与酚类含量成正比。

2. 检测步骤

1. 样品制备：同总抗氧化能力检测（70%乙醇提取）。

2. 标准曲线绘制：

• 称取没食子酸（Gallic acid）配制成0-100μg/mL系列标准溶液。

• 取1mL标准溶液，加入5mL福林-肖卡试剂（稀释10倍），混匀后静置5分钟。

• 加入4mL 7.5% Na₂CO₃溶液，混匀后避光反应1小时。

• 测定765nm波长下的吸光度，绘制标准曲线。

3. 样品测定：

• 取1mL样品提取液，按上述步骤反应后测吸光度。

• 根据标准曲线计算总酚含量（mg GAE/g DW，即每克干重大米中没食子酸当量）。

关键注意事项

1. 样品处理：

• 大米需粉碎均匀，避免局部成分差异影响结果。

• 提取溶剂（如70%乙醇）需优化，不同溶剂可能影响酚类物质提取效率。

2. 试剂保存：

• DPPH、ABTS、福林-肖卡试剂需避光保存，防止分解。

3. 反应条件：

• 反应时间、温度需严格控制（如DPPH法需避光反应30分钟）。

4. 干扰物质：

• 大米中可能含色素（如叶绿素、类胡萝卜素）干扰吸光度测定，可通过活性炭脱色或选择对干扰不敏感的方法（如ABTS法）。

5. 单位换算：

• 总抗氧化能力通常以μmol Trolox/g DW表示，总酚含量以mg GAE/g DW表示，需明确干重（DW）或鲜重（FW）基础。