化妆品液体聚六亚甲基双胍含量测定

化妆品液体聚六亚甲基双胍（PHMB）含量测定方法

聚六亚甲基双胍（Polyhexamethylene Biguanide, PHMB）是一种广谱抗菌剂，因其低毒性和高效性，常被用于化妆品中作为防腐剂或抗菌成分。其含量需严格控制在安全范围内，以确保产品的安全性和有效性。以下为化妆品中液体PHMB含量测定的常用方法及要点：

一、测定方法概述

目前，化妆品中PHMB的含量测定主要采用以下两种方法：

1. 高效液相色谱法（HPLC）

2. 紫外分光光度法（UV-Vis）

两种方法各有优缺点，HPLC灵敏度高、选择性强，适用于复杂基质中PHMB的定量分析；UV-Vis操作简便、成本低，但易受干扰，需优化前处理步骤。

二、高效液相色谱法（HPLC）

1. 原理
通过色谱柱分离样品中的PHMB，利用紫外检测器（UV）或质谱检测器（MS）定量分析。

2. 实验步骤

• 样品前处理：

• 称取适量化妆品样品（如0.5-1g），加入甲醇或水超声提取，过滤后取上清液。

• 对于含乳液或膏体的样品，可先离心分离水相，再提取PHMB。

• 色谱条件：

• 色谱柱：C18反相柱（如4.6mm×250mm，5μm）。

• 流动相：甲醇-水（含缓冲盐，如磷酸盐缓冲液），梯度洗脱。

• 检测波长：200-210nm（PHMB在紫外区有吸收）。

• 定量分析：

• 绘制标准曲线（PHMB浓度范围：0.1-10mg/L），外标法计算含量。

3. 注意事项

• PHMB易吸附于容器壁，需使用玻璃或聚丙烯材质容器。

• 流动相pH值需优化，避免PHMB解离或沉淀。

三、紫外分光光度法（UV-Vis）

1. 原理
PHMB在紫外区有特征吸收峰，通过测定吸光度定量分析。

2. 实验步骤

• 样品前处理：

• 称取样品，加入水或甲醇超声提取，过滤后稀释至一定体积。

• 对于含表面活性剂的样品，可加入有机溶剂（如氯仿）萃取PHMB。

• 测定条件：

• 波长：200-210nm（需扫描确认Zui大吸收峰）。

• 参比溶液：纯溶剂或空白基质。

• 定量分析：

• 绘制标准曲线（PHMB浓度范围：0.5-50mg/L），计算含量。

3. 注意事项

• 化妆品基质中的成分（如香精、色素）可能干扰吸光度，需进行背景扣除或基质匹配。

• 需控制pH值，避免PHMB解离导致吸光度变化。

四、方法验证与质量控制

1. 线性范围：标准曲线相关系数（R²）应≥0.999。

2. 回收率：在化妆品基质中添加PHMB标准品，回收率应在90%-110%之间。

3. 精密度：重复测定6次，相对标准偏差（RSD）应≤5%。

4. 检出限（LOD）和定量限（LOQ）：

• HPLC法：LOD ≤ 0.01mg/g，LOQ ≤ 0.05mg/g。

• UV-Vis法：LOD ≤ 0.1mg/g，LOQ ≤ 0.5mg/g。

五、法规与安全要求

1. 中国法规：

• 《化妆品安全技术规范》（2015版）规定PHMB在化妆品中的Zui大允许浓度为0.1%（以游离双胍计）。

• 需进行急性毒性、皮肤刺激性等安全性评价。

2. 国际法规：

• 欧盟（EC）No 1223/2009将PHMB列为限用物质，需在标签上标注。

• 美国FDA对PHMB在化妆品中的使用无明确限制，但需符合GMP要求。

六、建议

1. 方法选择：

• 优先采用HPLC法，适用于复杂基质和低含量PHMB的测定。

• UV-Vis法适用于快速筛查，但需优化前处理步骤以减少干扰。

2. 质量控制：

• 定期校准仪器，使用标准物质进行方法验证。

• 建立实验室内部质量控制程序，确保数据可靠性。

3. 法规合规：

• 化妆品生产企业需严格遵守国内外法规，控制PHMB含量在安全范围内。